本发明提供一种吖啶系列化学发光剂的制备方法,包括以下几个步骤:第一步:将4-氨基丁酸溶于第一溶剂,搅拌,冷却,依次加入三乙胺和对甲基苯磺酰氯,减压除去溶剂得产品即化合物2;第二步:将9-吖啶甲酸置于圆底烧瓶中,加入第二溶剂将其溶解,搅拌,冷却,依次加入第三溶剂,反应后,过滤固体收集滤液,得滤液A;将化合物2用第二溶剂将其溶解,冷却,缓慢分批加入无机碱,反应后,将滤液A缓慢滴加至反应体系,将反应体系升至室温并反应过夜;第三步:将化合物3置于烧瓶中,加入1,3-丙磺酸内酯,搅拌,加热反应后冷却至室温,洗涤,过滤收集固体,得化合物4粗产品。采用本发明中的方法,工艺简单,绿色环保,成本低。
1.一种吖啶系列化学发光剂的制备方法,其特征在于,包括以下几个步骤:第一步:将4-氨基丁酸溶于第一溶剂,搅拌,冷却,,依次加入三乙胺和对甲基苯磺酰氯,保持温度,反应结束后用调pH值,萃取产物,取有机相干燥,减压除去溶剂得产品即化合物2;第二步:将9-吖啶甲酸置于烧瓶中,加入第二溶剂将其溶解,搅拌,冷却,依次加入第三溶剂,反应后,过滤固体收集滤液,得滤液A;所述第三溶剂采用三乙胺和氯甲酸乙酯;将化合物2用第二溶剂溶解,冷却,缓慢分批加入无机碱,反应后,将滤液A缓慢滴加至反应体系,将反应体系升至室温并反应过夜,用水淬灭反应,减压除去溶剂,用盐酸调节,萃取产品,取有机相并干燥,,减压除去溶剂得粗产品,将粗产品进行柱层析纯化,用洗脱剂进行淋洗,得产品即化合物3;第三步:将化合物3置于烧瓶中,加入1,3-丙磺酸内酯,搅拌,加热反应后冷却至室温,洗涤,过滤收集固体,得化合物4粗产品;第四步:将化合物4溶于N,N-二甲基甲酰胺,搅拌,室温下依次加入三乙胺和3-琥珀酰亚胺基-1,1,3,3,-四甲基脲四氟硼酸酯,,反应后用制备液相色谱分离提纯产品,得产品即吖啶系列化学发光剂化合物5;;并且所述方法的具体过程如下:ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="700"/>
2.一种吖啶系列化学发光剂的制备方法,其特征在于,包括以下几个步骤:步骤A:将4-氨基丁酸置于烧瓶中,加入第一溶剂,,搅拌,冷却,依次加入三乙胺和对甲基苯磺酰氯,反应结束后用盐酸将pH调至3,然后用乙酸乙酯分两次萃取产物,取有机相并加入无水硫酸钠干燥,减压除去溶剂得产品即化合物2";步骤B:将1-甲氧基-9-吖啶甲酸置于烧瓶中,加入第二溶剂将其溶解,搅拌,冷却,依次加入三乙胺和氯甲酸乙酯反应结束后,过滤固体收集滤液,得滤液A;将化合物2"置于烧瓶中,加入第二溶剂将其溶解,,冷却,缓慢分批加入氢化钠,将滤液A缓慢滴加至反应体系,将反应体系升至室温并反应,用水淬灭反应,减压除去溶剂,调节pH,用乙酸乙酯萃取产品,取有机相并加入无水硫酸钠干燥,减压除去溶剂得粗产品;将粗产品进行柱层析纯化,,用洗脱剂进行淋洗,得产品即化合物3";步骤C:将化合物3"置于烧瓶中,加入1,3-丙磺酸内酯,磁力搅拌,加热反应后,冷却至室温,加入乙酸乙酯洗涤,过滤收集固体,得化合物4";步骤D:将化合物4"溶于第四溶剂中,磁力搅拌,室温下依次加入三乙胺和3-琥珀酰亚胺基-1,1,3,3,-四甲基脲四氟硼酸酯,反应后,用制备液相色谱分离提纯产品,得产品即吖啶系列化学发光剂化合物5";并且所述方法的具体过程如下:ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="700"/>
3.如权利要求1或2所述的吖啶系列化学发光剂的制备方法,,其特征在于,所述第一溶剂采用二氯甲烷,所述第二溶剂采用四氢呋喃。
4.如权利要求1所述的吖啶系列化学发光剂的制备方法,其特征在于,所述第一步中,冷却温度为0°C。
5.如权利要求2所述的吖啶系列化学发光剂的制备方法,其特征在于,所述步骤B中冷却温度为-10°C。
6.如权利要求1所述的吖啶系列化学发光剂的制备方法,其特征在于,第一步中,pH调至3。
7.如权利要求1或2所述的吖啶系列化学发光剂的制备方法,其特征在于,所述洗脱剂采用乙酸乙酯和石油醚的体积比为1:1的混合溶剂。
8.如权利要求2所述的吖啶系列化学发光剂的制备方法,其特征在于,所述步骤C中,加热至125°C,反应时间为1小时。
9.如权利要求2所述的吖啶系列化学发光剂的制备方法,其特征在于,所述第四溶剂采用N,N-二甲基甲酰胺。技术领域
本发明涉及一系列吖啶酯类及吖啶磺酰胺类衍生物的制备方法,尤其涉及一种制备高纯度吖啶系列化合物的化学合成与提纯方法。
背景技术
吖啶酯类及吖啶磺酰胺类衍生物是一类可用作化学发光标记物的化学物质。其应用于化学发光检测具有许多优越性。优点主要有:1背景发光低,信噪比高;2发光反应干扰因素少;3光释放快速集中、发光效率高、发光强度大;4易于与蛋白质联结且联结后光子产率不减少;5标记物稳定。因此,其是一类非常有效、非常好的化学发光标记物。由于吖啶酯及吖啶磺酰胺衍生化合物的制备工艺复杂,其供应商在全球也是只有寥寥数家,这导致了其价格高昂,也使得其在化学发光检测应用方面的推广受到阻碍。目前国内尚无全面通用的吖啶系列合成专利文献,国外涉及文献也多局限于单一的吖啶化合物的合成,且方法污染严重,甚至无法根据文献方法完成吖啶系列化合物的合成。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种方法简单且价格低廉的适用于吖啶酯和吖啶磺酰胺类化合物合成的方法。本发明提供了一种吖啶系列化学发光剂的制备方法,包括以下几个步骤:第一步:将4-氨基丁酸溶于第一溶剂,搅拌,冷却,依次加入三乙胺和对甲基苯磺酰氯,保持温度,反应结束后用调PH值,萃取产物,取有机相干燥,减压除去溶剂得产品即化合物2;第二步:将9-吖啶甲酸置于烧瓶中,加入第二溶剂将其溶解,搅拌,冷却,依次加入第三溶剂,反应后,过滤固体收集滤液,得滤液A;将化合物2用第二溶剂溶解,冷却,缓慢分批加入无机碱,反应后,将滤液A缓慢滴加至反应体系,将反应体系升至室温并反应过夜,用水淬灭反应,减压除去溶剂,用盐酸调节,萃取产品,取有机相并干燥,减压除去溶剂得粗产品。将粗产品进行柱层析纯化,用洗脱剂进行淋洗,得产品即化合物3;第三步:将化合物3置于烧瓶中,加入1,3-丙磺酸内酯,磁力搅拌,加热反应后,冷却至室温,洗涤,过滤收集固体,得化合物4粗产品;第四步:将化合物4溶于N,N-二甲基甲酰胺,搅拌,室温下依次加入三乙胺和3-琥珀酰亚胺基-1,1,3,3,-四甲基脲四氟硼酸酯,反应后用制备液相色谱分离提纯产品,得产品即化合物5。本发明还提供了另外一种吖啶系列化学发光剂的制备方法,包括以下几个步骤:步骤A:将4-氨基丁酸置于烧瓶中,加入第一溶剂,搅拌,冷却,依次加入三乙胺和对甲基苯磺酰氯,反应结束后用盐酸将PH调至3,然后用乙酸乙酯分两次萃取产物,取有机相并加入无水硫酸钠干燥,减压除去溶剂得产品即化合物2′;步骤B:化合物3′的制备。将1-甲氧基-9-吖啶甲酸置于圆底烧瓶中,加入第二溶剂将其溶解,搅拌,冷却,依次加入三乙胺和氯甲酸乙酯,反应1.5h,反应结束后,过滤固体收集滤液,得滤液A;将化合物2′置于烧瓶中,加入第二溶剂将其溶解,冷却,缓慢分批加入氢化钠,将滤液A缓慢滴加至反应体系,将反应体系升至室温并反应,用水淬灭反应,减压除去溶剂,调节PH,用萃取产品,取有机相并加入无水硫酸钠干燥,减压除去溶剂得粗产品。将粗产品进行柱层析纯化,用洗脱剂进行淋洗,得产品即化合物3′;步骤C:将化合物3′置于圆底烧瓶中,加入1,3-丙磺酸内酯,磁力搅拌,加热反应后,冷却至室温,加入乙酸乙酯洗涤,过滤收集固体,得化合物4′;步骤D:将化合物4′溶于第四溶剂中,磁力搅拌,室温下依次加入三乙胺和3-琥珀酰亚胺基-1,1,3,3,-四甲基脲四氟硼酸酯,反应后,用制备液相色谱分离提纯产品,得产品即化合物5′。优选的,所述第一溶剂采用二氯甲烷,所述第二溶剂采用四氢呋喃,第三溶剂采用三乙胺和氯甲酸乙酯。优选的,第一步中,冷却温度为0°C。优选的,所述步骤B中冷却至-10°C。优选的,第一步和步骤B中,PH调至3。优选的,萃取剂采用乙酸乙酯.优选的,所述洗脱剂采用乙酸乙酯和石油醚的体积比为1:1的混合溶剂。优选的,所述步骤C中,加热至125°C,反应时间为1小时。优选的,所述第四溶剂采用N,N-二甲基甲酰胺。本发明的有益效果是:采用本发明中的方法,工艺简单,绿色环保,成本低,对吖啶系列化学发光剂在化学发光检测应用方面的推广起到了一定的推动作用。
附图说明
图1是本发明吖啶磺酰胺类的反应机理图。图2是本发明吖啶酯类的反应机理图。
具体实施方式
下面结合附图,对本发明的较优的实施例作进一步的详细说明:吖啶磺酰胺类的反应机理如图1所示:其中,R为-H或-OMe,此取代基可连接在如图上所标示的1,2,3,4任一位置的碳上。实施例1R=H,吖啶磺酰胺I的制备:第一步:化合物2的制备。将化合物1即4-氨基丁酸1.03g(10mmol)置于圆底烧,加入40mL二氯甲烷,磁力搅拌,冷却至0°C,依次加入三乙胺2.02g(20mmol)和对甲基苯磺酰氯2.10g(11mmol),保持0°C反应1h,反应结束后用浓度为1mol/L盐酸将PH调至3,然后用200mL乙酸乙酯分两次萃取产物,取有机相并加入无水硫酸钠干燥,减压除去溶剂得产品即化合物2xa02.19g(8.50mmol),产率为85%。第二步:化合物3的制备。将9-吖啶甲酸1.12g(5mmol)置于圆底烧瓶中,加入25mL四氢呋喃将其溶解,磁力搅拌,冷却至-10°C,依次加入三乙胺0.61g(6mmol)和氯甲酸乙酯0.54g(5mmol),反应1.5h,反应结束后,过滤固体收集滤液,得滤液A;将化合物21.54g(6mmol)置于圆底烧瓶中,加入25mL四氢呋喃将其溶解,冷却至0°C。缓慢分批加入氢化钠0.14g(6mmol),反应20min后,将滤液A缓慢滴加至反应体系,将反应体系升至室温并反应过夜。用10mL水淬灭反应,减压除去溶剂,用浓度为1mol/L盐酸调节PH至3,用200mL乙酸乙酯分两次萃取产品,取有机相并加入无水硫酸钠干燥,减压除去溶剂得粗产品。将粗产品进行柱层析纯化,用乙酸乙酯:石油醚为1:1的洗脱剂进行淋洗,得产品即化合物31.94g(4.20mmol),产率为70%;第三步:化合物4的制备。将化合物3xa02.31g(5mmol)置于圆底烧瓶中,加入1,3-丙磺酸内酯9.16g(75mmol),磁力搅拌,加热至125°C,反应1h后,冷却至室温,加入100mL乙酸乙酯洗涤,过滤收集固体,得化合物4粗产品2.57g(4.50mmol),未进一步提纯;第四步:化合物5的制备。将化合物4xa01.14g(2mmol)置于圆底烧瓶,加入5mLN,N-二甲基甲酰胺,磁力搅拌,室温下依次加入三乙胺1.01g(10mmol)和3-琥珀酰亚胺基-1,1,3,3,-四甲基脲四氟硼酸酯1.81g(6mmol),反应3h后停止反应,用制备液相色谱分离提纯产品,得产品即化合物5xa01.23g(1.80mmol),产率为90%。实施例2R=OMe(此取代基连接在如图1上所标示的1位置的碳上),吖啶磺酰胺II的制备:第一步:化合物2的制备。将化合物1即4-氨基丁酸1.03g(10mmol)置于圆底烧,加入40mL二氯甲烷,磁力搅拌,冷却至0°C,依次加入三乙胺2.02g(20mmol)和对甲基苯磺酰氯2.10g(11mmol),保持0°C反应1h,反应结束后用浓度为1mol/L盐酸将PH调至3,然后用200mL乙酸乙酯分两次萃取产物,取有机相并加入无水硫酸钠干燥,减压除去溶剂得产品即化合物2xa02.19g(8.50mmol),产率为85%。第二步:化合物3的制备,将1-甲氧基-9-吖啶甲酸1.27g(5mmol)置于圆底烧瓶中,加入25mL四氢呋喃将其溶解,磁力搅拌,冷却至-10°C,依次加入三乙胺0.61g(6mmol)和氯甲酸乙酯0.54g(5mmol),反应1.5h,反应结束后,过滤固体收集滤液,得滤液A;将化合物2xa01.54g(6mmol)置于圆底烧瓶中,加入25mL四氢呋喃将其溶解,冷却至0°C。缓慢分批加入氢化钠0.14g(6mmol),反应20min后,将滤液A缓慢滴加至反应体系,将反应体系升至室温并反应过夜。用10mL水淬灭反应,减压除去溶剂,用浓度为1mol/L盐酸调节PH至3,用200mL乙酸乙酯分两次萃取产品,取有机相并加入无水硫酸钠干燥,减压除去溶剂得粗产品。将粗产品进行柱层析纯化,用乙酸乙酯:石油醚为1:1的洗脱剂进行淋洗,得产品即化合物3xa02.22g(4.50mmol),产率为75%;第三步:化合物4的制备。将化合物3xa02.47g(5mmol)置于圆底烧瓶中,加入1,3-丙磺酸内酯9.16g(75mmol),磁力搅拌,加热至125°C,反应1h后,冷却至室温,加入100mL乙酸乙酯洗涤,过滤收集固体,得化合物4粗产品2.71g(4.5mmol),未进一步提纯;第四步:化合物5的制备。将化合物4xa01.21g(2mmol)置于圆底烧瓶,加入5mLN,N-二甲基甲酰胺,磁力搅拌,室温下依次加入三乙胺1.01g(10mmol)和3-琥珀酰亚胺基-1,1,3,3,-四甲基脲四氟硼酸酯1.81g(6mmol),反应3h后停止反应,用制备液相色谱分离提纯产品,得产品即化合物5xa01.25g(1.76mmol),产率为88%。实施例3R=OMe,(此取代基连接在如图1上所标示的2位置的碳上),吖啶磺酰胺III的制备第一步:化合物2的制备。将化合物1即4-氨基丁酸1.03g(10mmol)置于圆底烧,加入40mL二氯甲烷,磁力搅拌,冷却至0°C,依次加入三乙胺2.02g(20mmol)和对甲基苯磺酰氯2.10g(11mmol),保持0°C反应1h,反应结束后用浓度为1mol/L盐酸将PH调至3,然后用200mL乙酸乙酯分两次萃取产物,取有机相并加入无水硫酸钠干燥,减压除去溶剂得产品即化合物2xa02.19g(8.50mmol),产率为85%;第二步:化合物3的制备。将2-甲氧基-9-吖啶甲酸1.27g(5mmol)置于圆底烧瓶中,加入25mL四氢呋喃将其溶解,磁力搅拌,冷却至-10°C,依次加入三乙胺0.61g(6mmol)和氯甲酸乙酯0.54g(5mmol),反应1.5h,反应结束后,过滤固体收集滤液,得滤液A;将化合物21.54g(6mmol)置于圆底烧瓶中,加入25mL四氢呋喃将其溶解,冷却至0°C。缓慢分批加入氢化钠0.14g(6mmol),反应20min后,将滤液A缓慢滴加至反应体系,将反应体系升至室温并反应过夜。用10mL水淬灭反应,减压除去溶剂,用浓度为1mol/L盐酸调节PH至3,用200mL乙酸乙酯分两次萃取产品,取有机相并加入无水硫酸钠干燥,减压除去溶剂得粗产品。将粗产品进行柱层析纯化,用乙酸乙酯:石油醚为1:1的洗脱剂进行淋洗,得产品即化合物3xa02.37g(4.80mmol),产率为80%;第三步:化合物4的制备。将化合物3xa02.47g(5mmol)置于圆底烧瓶中,加入1,3-丙磺酸内酯9.16g(75mmol),磁力搅拌,加热至125°C,反应1h后,冷却至室温,加入100mL乙酸乙酯洗涤,过滤收集固体,得化合物4粗产品2.83g(4.70mmol),未进一步提纯;第四步:化合物5的制备。将化合物4xa01.21g(2mmol)置于圆底烧瓶,加入5mLN,N-二甲基甲酰胺,磁力搅拌,室温下依次加入三乙胺1.01g(10mmol)和3-琥珀酰亚胺基-1,1,3,3,-四甲基脲四氟硼酸酯1.81g(6mmol),反应3h后停止反应,用制备液相色谱分离提纯产品,得产品即化合物5xa01.30g(1.82mmol),产率为91%。实施例4R=OMe,(此取代基连接在如图1上所标示的3位置的碳上),吖啶磺酰胺IV的制备:第一步:化合物2的制备。将化合物1即4-氨基丁酸1.03g(10mmol)置于圆底烧,加入40mL二氯甲烷,磁力搅拌,冷却至0°C,依次加入三乙胺2.02g(20mmol)和对甲基苯磺酰氯2.10g(11mmol),保持0°C反应1h,反应结束后用浓度为1mol/L盐酸将PH调至3,然后用200mL乙酸乙酯分两次萃取产物,取有机相并加入无水硫酸钠干燥,减压除去溶剂得产品即化合物2xa02.19g(8.5mmol),产率为85%。第二步:化合物3的制备。将3-甲氧基-9-吖啶甲酸1.27g(5mmol)置于圆底烧瓶中,加入25mL四氢呋喃将其溶解,磁力搅拌,冷却至-10°C,依次加入三乙胺0.61g(6mmol)和氯甲酸乙酯0.54g(5mmol),反应1.5h,反应结束后,过滤固体收集滤液,得滤液A。将化合物2xa01.54g(6mmol)置于圆底烧瓶中,加入25mL四氢呋喃将其溶解,冷却至0°C。缓慢分批加入氢化钠0.14g(6mmol),反应20min后,将滤液A缓慢滴加至反应体系,将反应体系升至室温并反应过夜。用10mL水淬灭反应,减压除去溶剂,用浓度为1mol/L盐酸调节PH至3,用200mL乙酸乙酯分两次萃取产品,取有机相并加入无水硫酸钠干燥,减压除去溶剂得粗产品。将粗产品进行柱层析纯化,用乙酸乙酯:石油醚为1:1的洗脱剂进行淋洗,得产品即化合物3xa02.22g(4.50mmol),产率为75%。第三步:化合物4的制备。将化合物3xa02.47g(5mmol)置于圆底烧瓶中,加入1,3-丙磺酸内酯9.16g(75mmol),磁力搅拌,加热至125°C,反应1h后,冷却至室温,加入100mL乙酸乙酯洗涤,过滤收集固体,得化合物4粗产品2.89g(4.80mmol),未进一步提纯。第四步:化合物5的制备。将化合物41.21g(2mmol)置于圆底烧瓶,加入5mLN,N-二甲基甲酰胺,磁力搅拌,室温下依次加入三乙胺1.01g(10mmol)和3-琥珀酰亚胺基-1,1,3,3,-四甲基脲四氟硼酸酯1.81g(6mmol),反应3h后停止反应,用制备液相色谱分离提纯产品,得产品即化合物5xa01.21g(1.70mmol),产率为85%。实施例5R=OMe,(此取代基连接在如图1上所标示的4位置的碳上),吖啶磺酰胺V的制备:第一步:化合物2的制备。将化合物1即4-氨基丁酸1.03g(10mmol)置于圆底烧,加入40mL二氯甲烷,磁力搅拌,冷却至0°C,依次加入三乙胺2.02g(20mmol)和对甲基苯磺酰氯2.10g(11mmol),保持0°C反应1h,反应结束后用浓度为1mol/L盐酸将PH调至3,然后用200mL乙酸乙酯分两次萃取产物,取有机相并加入无水硫酸钠干燥,减压除去溶剂得产品即化合物2xa02.19g(8.5mmol),产率为85%。第二步:化合物3的制备。将4-甲氧基-9-吖啶甲酸1.27g(5mmol)置于圆底烧瓶中,加入25mL四氢呋喃将其溶解,磁力搅拌,冷却至-10°C,依次加入三乙胺0.61g(6mmol)和氯甲酸乙酯0.54g(5mmol),反应1.5h,反应结束后,过滤固体收集滤液,得滤液A;将化合物2xa01.54g(6mmol)置于圆底烧瓶中,加入25mL四氢呋喃将其溶解,冷却至0°C。缓慢分批加入氢化钠0.14g(6mmol),反应20min后,将滤液A缓慢滴加至反应体系,将反应体系升至室温并反应过夜。用10mL水淬灭反应,减压除去溶剂,用浓度为1mol/L盐酸调节PH至3,用200mL乙酸乙酯分两次萃取产品,取有机相并加入无水硫酸钠干燥,减压除去溶剂得粗产品。将粗产品进行柱层析纯化,用乙酸乙酯:石油醚为1:1的洗脱剂进行淋洗,得产品即化合物3xa02.01g(4.08mmol),产率为68%;第三步:化合物4的制备。将化合物3xa02.47g(5mmol)置于圆底烧瓶中,加入1,3-丙磺酸内酯9.16g(75mmol),磁力搅拌,加热至125°C,反应1h后,冷却至室温,加入100mL乙酸乙酯洗涤,过滤收集固体,得化合物4粗产品2.53g(4.20mmol),未进一步提纯;第四步:化合物5的制备。将化合物41.21g(2mmol)置于圆底烧瓶,加入5mLN,N-二甲基甲酰胺,磁力搅拌,室温下依次加入三乙胺1.01g(10mmol)和3-琥珀酰亚胺基-1,1,3,3,-四甲基脲四氟硼酸酯1.81g(6mmol),反应3h后停止反应,用制备液相色谱分离提纯产品,得产品即化合物5xa01.17g(1.64mmol),产率为82%。实施例6吖啶酯类的反应机理如图2所示,其中,R为-H或-OMe,此取代基可连接在如图2上所标示的1,2,3,4任一位置的碳上R=H,吖啶酯I的制备:第一步:化合物2′的制备。将化合物1′3.32g(20mmol)置于圆底烧瓶中,加入100mL甲醇,磁力搅拌,冷却至0°C,缓慢滴加氯化亚砜1.5mL(20mmol)至反应液中,滴加完毕将反应体系升至室温,搅拌18h后减压除去溶剂,得产品即化合物2xa03.42g(19mmol),产率为95%。第二步:化合物4′的制备。将9-吖啶甲酸1.12g(5mmol)置于圆底烧瓶中,加入25mL四氢呋喃,磁力搅拌,冷却至-10°C,依次加入三乙胺0.61g(6mmol)和氯甲酸乙酯0.54g(5mmol),反应1.5h,反应结束后,过滤,收集滤液,得滤液A。将化合物2′1.08g(6mmol)置于圆底烧瓶中,加入25ml四氢呋喃,磁力搅拌,冷却至0°C,加入三乙胺0.61g(6mmol),反应10min后,将滤液A缓慢滴加至反应液中,反应体系升至室温并反应过夜。用10mL水淬灭反应,减压除去溶剂,然后用200mL乙酸乙酯分两次萃取产品,取有机相,加入无水硫酸钠干燥,减压除去溶剂得粗产品。将粗产品进行柱层析纯化,用乙酸乙酯:石油醚体积比为1:2的溶剂进行淋洗,得产品即化合物4xa01.58g(4.1mmol),产率为82%。第三步:化合物5′的制备。将化合物4′1.93g(5mmol)置于圆底烧瓶中,加入1,3-丙磺酸内酯9.16g(75mmol),磁力搅拌,加热至125°C,反应1h后,冷却至室温,加入100mL乙酸乙酯洗涤,过滤收集固体,得粗产品。将粗产品置于圆底烧瓶中,加入50mL浓度为1mol/L的盐酸,磁力搅拌,回流3h后冷却至室温,过滤得黄色固体,用100mL乙醚分两次洗涤固体,收集固体,最终得产品即化合物5xa01.85g(3.75mmol),产率为75%。第四步:化合物6的制备。将化合物5′2.47g(5mmol)置于圆底烧瓶中,加入30mLxa0N,N-二甲基甲酰胺,室温下依次加入三乙胺2.02g(20mmol)和3-琥珀酰亚胺基-1,1,3,3,-四甲基脲四氟硼酸酯4.52g(15mmol),反应3h后,停止反应,用制备液相色谱分离提纯产品,得产品即化合物6xa02.54g(4.30mmol),产率为86%。第五步:化合物7的制备。将化合物10xa05.61g(20mmol)置于圆底烧瓶中,加入100mL甲醇搅拌溶解,依次加入二异丙基乙基胺2.58g(20mmol)和戊二酸酐5.71g(50mmol),室温搅拌5h后停止反应,减压除去溶剂得油状粗产品,柱层析分离产品,得产品即化合物7xa05.92g(15mmol),产率为75%。第六步:化合物8的制备。将化合物6xa01.18g(2mmol)置于圆底烧瓶中,加入5mLxa0N,N-二甲基甲酰胺,磁力搅拌,室温下加入化合物7,搅拌3h后停止反应,用制备液相色谱分离提纯产品,得产品即化合物8xa01.64g(1.82mmol),产率为91%。第七步:化合物9的制备。将化合物8xa00.90g(1mmol)置于圆底烧瓶中,加入3mLxa0N,N-二甲基甲酰胺,磁力搅拌,冷却至0°C,依次加入三乙胺0.51g(5mol)和3-琥珀酰亚胺基-1,1,3,3,-四甲基脲四氟硼酸酯1.20g(4mmol),反应3h后停止反应,用制备液相色谱分离产品,得产品即化合物9xa00.92g(0.92mmol),产率为92%。实施例7R=OMe(此取代基连接在如图2上所标示的1位置的碳上),吖啶酯II的制备:第一步:化合物2′的制备。将化合物1′3.32g(20mmol)置于圆底烧瓶中,加入100mL甲醇,磁力搅拌,冷却至0°C,缓慢滴加氯化亚砜1.5mL(20mmol)至反应液中,滴加完毕将反应体系升至室温,搅拌18h后减压除去溶剂,得产品即化合物2xa03.42g(19mmol),产率为95%。第二步:化合物4′的制备。将1-甲氧基-9-吖啶甲酸1.27g(5mmol)置于圆底烧瓶中,加入25mL四氢呋喃,磁力搅拌,冷却至-10°C,依次加入三乙胺0.61g(6mmol)和氯甲酸乙酯0.54g(5mmol),反应1.5h,反应结束后,过滤,收集滤液,得滤液A。将化合物2′1.08g(6mmol)置于圆底烧瓶中,加入25ml四氢呋喃,磁力搅拌,冷却至0°C,加入三乙胺0.61g(6mmol),反应10min后,将滤液A缓慢滴加至反应液中,反应体系升至室温并反应过夜。用10mL水淬灭反应,减压除去溶剂,然后用200mL乙酸乙酯分两次萃取产品,取有机相,加入无水硫酸钠干燥,减压除去溶剂得粗产品。将粗产品进行柱层析纯化,用乙酸乙酯:石油醚为1:2的溶剂进行淋洗,得产品即化合物4xa02.00g(4.80mmol),产率为96%。第三步:化合物5′的制备。将化合物4′2.08g(5mmol)置于圆底烧瓶中,加入1,3-丙磺酸内酯9.16g(75mmol),磁力搅拌,加热至125°C,反应1h后,冷却至室温,加入100mL乙酸乙酯洗涤,过滤收集固体,得粗产品。将粗产品置于圆底烧瓶中,加入50mL浓度为1mol/L的盐酸,磁力搅拌,回流3h后冷却至室温,过滤得黄色固体,用100mL乙醚分两次洗涤固体,收集固体,最终得产品即化合物5′2.10g(4.00mmol),产率为80%。第四步:化合物6的制备。将化合物5′2.62g(5mmol)置于圆底烧瓶中,加入30mLxa0N,N-二甲基甲酰胺,室温下依次加入三乙胺2.02g(20mmol)和3-琥珀酰亚胺基-1,1,3,3,-四甲基脲四氟硼酸酯4.5g(15mmol),反应3h后,停止反应,用制备液相色谱分离提纯产品,得产品即化合物6xa02.58g(4.15mmol),产率为83%。第五步:化合物7的制备。将化合物10xa05.60g(20mmol)置于圆底烧瓶中,加入100mL甲醇搅拌溶解,依次加入二异丙基乙基胺2.58g(20mmol)和戊二酸酐5.71g(50mmol),室温搅拌5h后停止反应,减压除去溶剂得油状粗产品,柱层析分离产品,得产品即化合物7xa05.92g(15mmol),产率为75%。第六步:化合物8的制备。将化合物6xa01.24g(2mmol)置于圆底烧瓶中,加入5mLxa0N,N-二甲基甲酰胺,磁力搅拌,室温下加入化合物7,搅拌3h后停止反应,用制备液相色谱分离提纯产品,得产品即化合物8xa01.66g(1.78mmol),产率为89%。第七步:化合物9的制备。将化合物8xa00.93g(1mmol)置于圆底烧瓶中,加入3mLxa0N,N-二甲基甲酰胺,磁力搅拌,冷却至0°C,依次加入三乙胺0.51g(5mmol)和3-琥珀酰亚胺基-1,1,3,3,-四甲基脲四氟硼酸酯1.20g(4mmol),反应3h后停止反应,用制备液相色谱分离产品,得产品即化合物9xa00.93g(0.90mmol),产率为90%。实施例8R=OMe(此取代基连接在如图2上所标示的2位置的碳上),吖啶酯III的制备:第一步:化合物2′的制备。将化合物1′3.32g(20mmol)置于圆底烧瓶中,加入100mL甲醇,磁力搅拌,冷却至0°C,缓慢滴加氯化亚砜1.5mL(20mmol)至反应液中,滴加完毕将反应体系升至室温,搅拌18h后减压除去溶剂,得产品即化合物2′3.42g(19mmol),产率为95%。第二步:化合物4′的制备。将2-甲氧基-9-吖啶甲酸1.27g(5mmol)置于圆底烧瓶中,加入25mL四氢呋喃,磁力搅拌,冷却至-10°C,依次加入三乙胺0.61g(6mmol)和氯甲酸乙酯0.54g(5mmol),反应1.5h,反应结束后,过滤,收集滤液,得滤液A。将化合物2′1.08g(6mmol)置于圆底烧瓶中,加入25ml四氢呋喃,磁力搅拌,冷却至0°C,加入三乙胺0.61g(6mmol),反应10min后,将滤液A缓慢滴加至反应液中,反应体系升至室温并反应过夜。用10mL水淬灭反应,减压除去溶剂,然后用200mL乙酸乙酯分两次萃取产品,取有机相,加入无水硫酸钠干燥,减压除去溶剂得粗产品。将粗产品进行柱层析纯化,用乙酸乙酯:石油醚体积比为1:2的溶剂进行淋洗,得产品即化合物4′1.7g(4.10mmol),产率为82%。第三步:化合物5′的制备。将化合物4′2.08g(5mmol)置于圆底烧瓶中,加入1,3-丙磺酸内酯9.16g(75mmol),磁力搅拌,加热至125°C,反应1h后,冷却至室温,加入100mL乙酸乙酯洗涤,过滤收集固体,得粗产品。将粗产品置于圆底烧瓶中,加入50mL浓度为1mol/L的盐酸,磁力搅拌,回流3h后冷却至室温,过滤得黄色固体,用100mL乙醚分两次洗涤固体,收集固体,最终得产品即化合物5xa02.15g(4.10mmol),产率为82%。第四步:化合物6的制备。将化合物5′2.62g(5mmol)置于圆底烧瓶中,加入30mLxa0N,N-二甲基甲酰胺,室温下依次加入三乙胺2.02g(20mmol)和3-琥珀酰亚胺基-1,1,3,3,-四甲基脲四氟硼酸酯4.5g(15mmol),反应3h后,停止反应,用制备液相色谱分离提纯产品,得产品即化合物6xa02.42g(3.90mmol),产率为78%。第五步:化合物7的制备。将化合物10xa05.60g(20mmol)置于圆底烧瓶中,加入100mL甲醇搅拌溶解,依次加入二异丙基乙基胺2.58g(20mmol)和戊二酸酐5.71g(50mmol),室温搅拌5h后停止反应,减压除去溶剂得油状粗产品,柱层析分离产品,得产品即化合物7xa05.92g(15mmol),产率为75%。第六步:化合物8的制备。将化合物6xa01.24g(2mmol)置于圆底烧瓶中,加入5mLxa0N,N-二甲基甲酰胺,磁力搅拌,室温下加入化合物7,搅拌3h后停止反应,用制备液相色谱分离提纯产品,得产品即化合物8xa01.68g(1.80mmol),产率为90%。第七步:化合物9的制备。将化合物8xa00.93g(1mmol)置于圆底烧瓶中,加入3mLxa0N,N-二甲基甲酰胺,磁力搅拌,冷却至0°C,依次加入三乙胺0.51g(5mmol)和3-琥珀酰亚胺基-1,1,3,3,-四甲基脲四氟硼酸酯1.20g(4mmol),反应3h后停止反应,用制备液相色谱分离产品,得产品即化合物9,数量为0.91g(0.88mmol),产率为88%。实施例9R=OMe(此取代基连接在如图2上所标示的3位置的碳上),吖啶酯IV的制备:第一步:化合物2′的制备。将化合物1′称取3.32g(20mmol)置于圆底烧瓶中,加入100mL甲醇,磁力搅拌,冷却至0°C,缓慢滴加氯化亚砜1.5mL(20mmol)至反应液中,滴加完毕将反应体系升至室温,搅拌18h后减压除去溶剂,得产品即化合物2约3.42g(19mmol),产率为95%。第二步:化合物4′的制备。将3-甲氧基-9-吖啶甲酸1.27g(5mmol)置于圆底烧瓶中,加入25mL四氢呋喃,磁力搅拌,冷却至-10°C,依次加入三乙胺0.61g(6mmol)和氯甲酸乙酯0.54g(5mmol),反应1.5h,反应结束后,过滤,收集滤液,得滤液A。将化合物2′称取1.08g(6mmol)置于圆底烧瓶中,加入25ml四氢呋喃,磁力搅拌,冷却至0°C,加入三乙胺0.61g(6mmol),反应10min后,将滤液A缓慢滴加至反应液中,反应体系升至室温并反应过夜。用10mL水淬灭反应,减压除去溶剂,然后用200mL乙酸乙酯分两次萃取产品,取有机相,加入无水硫酸钠干燥,减压除去溶剂得粗产品。将粗产品进行柱层析纯化,用乙酸乙酯:石油醚体积比为1:2的溶剂进行淋洗,得产品即化合物4xa01.77g(4.28mmol),产率为85%。第三步:化合物5′的制备。将化合物4′2.08g(5mmol)置于圆底烧瓶中,加入1,3-丙磺酸内酯9.16g(75mmol),磁力搅拌,加热至125°C,反应1h后,冷却至室温,加入100mL乙酸乙酯洗涤,过滤收集固体,得粗产品。将粗产品置于圆底烧瓶中,加入50mL浓度为1mol/L的盐酸,磁力搅拌,回流3h后冷却至室温,过滤得黄色固体,用100mL乙醚分两次洗涤固体,收集固体,最终得产品即化合物5′2.23g(4.25mmol),产率为85%。第四步:化合物6的制备。将化合物5′2.62g(5mmol)置于圆底烧瓶中,加入30mLxa0N,N-二甲基甲酰胺,室温下依次加入三乙胺2.02g(20mmol)和3-琥珀酰亚胺基-1,1,3,3,-四甲基脲四氟硼酸酯4.52g(15mmol),反应3h后,停止反应,用制备液相色谱分离提纯产品,得产品即化合物6约2.49g(4.00mmol),产率为80%。第五步:化合物7的制备。将化合物10xa05.60g(20mmol)置于圆底烧瓶中,加入100mL甲醇搅拌溶解,依次加入二异丙基乙基胺2.58g(20mmol)和戊二酸酐5.71g(50mmol),室温搅拌5h后停止反应,减压除去溶剂得油状粗产品,柱层析分离产品,得产品即化合物7约5.92g(15mmol),产率为75%。第六步:化合物8的制备。将化合物6称取1.24g(2mmol)置于圆底烧瓶中,加入5mLxa0N,N-二甲基甲酰胺,磁力搅拌,室温下加入化合物7,搅拌3h后停止反应,用制备液相色谱分离提纯产品,得产品即化合物8约1.64g(1.76mmol),产率为88%。第七步:化合物9的制备。将化合物8称取0.93g(1mmol)置于圆底烧瓶中,加入3mLxa0N,N-二甲基甲酰胺,磁力搅拌,冷却至0°C,依次加入三乙胺0.51g(5mmol)和3-琥珀酰亚胺基-1,1,3,3,-四甲基脲四氟硼酸酯1.20g(4mmol),反应3h后停止反应,用制备液相色谱分离产品,得产品即化合物9约0.92g(0.89mmol),产率为89%。实施例10R=OMe(此取代基连接在如图2上所标示的4位置的碳上),吖啶酯V的制备:第一步:化合物2′的制备。将化合物1称取3.32g(20mmol)置于圆底烧瓶中,加入100mL甲醇,磁力搅拌,冷却至0°C,缓慢滴加氯化亚砜1.5mL(20mmol)至反应液中,滴加完毕将反应体系升至室温,搅拌18h后减压除去溶剂,得产品即化合物2′约3.42g(19mmol),产率为95%。第二步:化合物4′的制备。将4-甲氧基-9-吖啶甲酸1.27g(5mmol)置于圆底烧瓶中,加入25mL四氢呋喃,磁力搅拌,冷却至-10°C,依次加入三乙胺0.61g(6mmol)和氯甲酸乙酯0.54g(5mmol),反应1.5h,反应结束后,过滤,收集滤液,得滤液A。将化合物2′称取1.08g(6mmol)置于圆底烧瓶中,加入25ml四氢呋喃,磁力搅拌,冷却至0°C,加入三乙胺0.61g(6mmol),反应10min后,将滤液A缓慢滴加至反应液中,反应体系升至室温并反应过夜。用10mL水淬灭反应,减压除去溶剂,然后用200mL乙酸乙酯分两次萃取产品,取有机相,加入无水硫酸钠干燥,减压除去溶剂得粗产品。将粗产品进行柱层析纯化,用乙酸乙酯:石油醚体积比为1:2的溶剂进行淋洗,得产品即化合物4′1.86g(4.5mmol),产率为90%。第三步:化合物5′的制备。将化合物4′称取2.08g(5mmol)置于圆底烧瓶中,加入1,3-丙磺酸内酯9.16g(75mmol),磁力搅拌,加热至125°C,反应1h后,冷却至室温,加入100mL乙酸乙酯洗涤,过滤收集固体,得粗产品。将粗产品置于圆底烧瓶中,加入50mL浓度为1mol/L的盐酸,磁力搅拌,回流3h后冷却至室温,过滤得黄色固体,用100mL乙醚分两次洗涤固体,收集固体,最终得产品即化合物5′约2.18g(4.15mmol),产率为83%。第四步:化合物6的制备。将化合物5′称取2.62g(5mmol)置于圆底烧瓶中,加入30mLxa0N,N-二甲基甲酰胺,室温下依次加入三乙胺2.02g(20mmol)和3-琥珀酰亚胺基-1,1,3,3,-四甲基脲四氟硼酸酯4.5g(15mmol),反应3h后,停止反应,用制备液相色谱分离提纯产品,得产品即化合物6约2.52g(4.05mmol),产率为81%。第五步:化合物7的制备。将化合物10称取5.60g(20mmol)置于圆底烧瓶中,加入100mL甲醇搅拌溶解,依次加入二异丙基乙基胺2.58g(20mmol)和戊二酸酐5.71g(50mmol),室温搅拌5h后停止反应,减压除去溶剂得油状粗产品,柱层析分离产品,得产品即化合物7约5.92g(15mmol),产率为75%。第六步:化合物8的制备。将化合物6称取1.24g(2mmol)置于圆底烧瓶中,加入5mLxa0N,N-二甲基甲酰胺,磁力搅拌,室温下加入化合物7,搅拌3h后停止反应,用制备液相色谱分离提纯产品,得产品即化合物8约1.71g(1.84mmol),产率为92%。第七步:化合物9的制备。将化合物8约0.93g(1mmol)置于圆底烧瓶中,加入3mLxa0N,N-二甲基甲酰胺,磁力搅拌,冷却至0°C,依次加入三乙胺0.51g(5mmol)和3-琥珀酰亚胺基-1,1,3,3,-四甲基脲四氟硼酸酯1.20g(4mmol),反应3h后停止反应,用制备液相色谱分离产品,得产品即化合物9约0.96g(0.93mmol),产率为93%。目前拜耳吖啶酯化学发光法,西门子吖啶酯化学发光法,雅培吖啶酯化学发光法等,检测灵敏度均达到或超过10^-15mmol,并且进行了广泛的应用。如利用吖啶酯化学发光剂对p24抗体进行标记,进行基于吖啶酯标记的抗体p24对HIV-I检测的化学发光免疫分析法,吖啶酯标记的DNA寡核苷酸探针测定△F508、△I507囊性纤维化基因突变,利用吖啶酯化学发光免疫分析法检测乳腺癌患者血清雌二醇、卵泡刺激素及黄体生成素等。经测试,如表1所示,实施例1-10得到的发光性能良好.(发光信号强度RLU)表1ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="700"/>ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="593"/>以上内容是结合具体的优选实施方式对本发明所作的进一步详细说明,不能认定本发明的具体实施只局限于这些说明。对于本发明所属技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明构思的前提下,还可以做出若干简单推演或替换,都应当视为属于本发明的保护范围。